作者：荚卫东李永山
单位：安徽省立医院普通外科， 合肥 230001
目的：探讨硒对梗阻性黄疸肝细胞的保护作用。
方法：用大鼠制备成梗阻性黄疸动物模型，通过生化检测和电镜观察补硒大鼠肝功能变化和肝细胞超微结构改变。
结果：硒能明显降低梗阻性黄疸大鼠血清谷丙转氨酶、总胆红素及直接胆红素(P＜0.01)，减轻肝细胞超微结构的损伤。
结论：硒对梗阻性黄疸肝细胞的结构和功能有一定的保护作用，是一种有应用前途的肝细胞保护剂。
中图分类号：R575 文献标识码：A
文章编号：1007-810X(1999)-04-0210-02*
关键词：硒；梗阻性黄疸；肝功能；超微结构
梗阻性黄疸所致的肝细胞损害，是造成病人手术后出血、感染、肝肾综合征等合并症的主要因素。实验研究证实，胆汁酸与梗阻性黄疸的肝损害密切相关，其作用机制与肝细胞能量代谢障碍和脂质过氧化有关［1，2］。微量元素硒可以改善过氧化物系统内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。但硒对梗阻性黄疸后肝细胞是否有保护作用尚未见报道。本实验探讨硒对梗阻性黄疸肝细胞的保护作用。
1 材料和方法
1.1 实验动物与分组 健康雄性Spragua-Dawley大鼠30只(上海实验动物中心供给)，体重250～300 g，随机分成三组，每组10只。A组：假手术对照组；B组：胆总管结扎+等渗盐水组；C组：胆总管结扎+给硒组。
1.2 实验模型及观察指标 术前大鼠禁食12 h，3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，剖腹结扎胆总管，制作梗阻性黄疸动物模型。从术后72 h开始，A组与B组喂以等渗盐水和标准饲料，C组喂以富硒康每天10 mg/kg(安徽省生物工程药业有限公司生产)和标准饲料，连续用药1周。于术后10天处死大鼠，取血分别测定血清谷丙转氨酶(SGPT)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)(美国Beckman公司synchron CX生化分析仪)，同时取肝组织，2.5%戊二醛固定后切块，乙醇依次脱水，Spurr包埋，超薄切片，枸橼酸染色，于DX-75型电镜(上海光电所生产)下观察肝细胞超微结构变化。
1.3 统计学处理 所有实验数据均以平均数±标准差(
±s)表示。显著性检验用t检验。
2 结果
2.1 血清生化变化 B组在胆总管结扎10天后，SGPT、TB及DB均明显升高(与A组相比较，P＜0.01)。C组与B组相比较，术后第10天SGPT、TB及DB的升高趋势明显减轻(P＜0.01)，如表1所示。
表1 术后第10天三组间SGPT、TB及DB的变化(±s)
Table 1 Postoperative change of SGPT,TB and DB
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组别
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SGPT
(IU/L)
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TB
(μmol/L)
|
DB
(μmol/L)
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A
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48.96±2.04
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7.07±0.59
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4.91±0.60
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B
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75.14±2.28△
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25.20±2.84△
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16.11±1.19△
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C
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55.67±2.41△△
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13.60±2.15△△
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10.53±1.48△△
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△与A组比较，P＜0.01； △△与B组相比较，P＜0.01
2.2 肝细胞超微结构变化 B组：肝细胞内内质网减少，并有破坏现象；线粒体肿胀，内膜不完整，嵴突有破坏；高尔基复合体变形，结构破坏；胞核圆形，染色质呈分散凝固状。C组：肝细胞胞核及染色质受损较轻，线粒体内膜尚完整，嵴突尚清晰，内质网完整，高尔基复合体破坏较轻。
3 讨论
近年来，运用离子选择性微电极技术证实，梗阻性黄疸时肝细胞内胆汁酸含量明显上升，并且是肝细胞超微结构损害的原因之一［3］。胆汁酸对肝细胞具有细胞毒作用，其机制与细胞内线粒体结构和功能损害，抑制ATP合成有关［1］。由于肝细胞内线粒体受损，使肝细胞内氧化磷酸化产能减少，导致了肝细胞生物膜损伤、钙泵功能丧失，肝细胞内高Ca2+又加速了氧自由基催化剂黄嘌呤氧化酶的转化，促进了肝细胞的损害。
硒作为人体必需的微量元素，是GSH-Px的必需成分，可以改善GSH-Px的活性，并能保护肝细胞生物膜免受细胞毒的损伤，在抗脂质过氧化物体系中起着极其重要的作用。本实验B组在大鼠胆总管结扎10天后，SGPT、TB及DB明显升高，肝细胞超微结构明显受损。C组给予富硒康，SGPT、TB及DB明显降低(P＜0.01)，肝细胞超微结构损伤程度减轻，说明了硒对梗阻性黄疸后肝细胞的形态和功能均有一定的保护作用。其机制可能在于硒作为一种氧自由基清除剂，并能保护肝细胞膜上的GSH-Px活性，维持线粒体结构和功能，促进ATP合成，给线粒体功能受损的肝细胞提供合适的能量支持，从而拮抗梗阻性黄疸时内源性胆汁酸的毒性作用，减轻了肝细胞的损害。
以上研究结果表明，硒是一种有应用前途的肝细胞保护剂，对梗阻性黄疸后肝细胞有一定的保护作用，可望减少梗阻性黄疸病人术后并发症。
作者简介：荚卫东(1968-)，男，安徽省巢湖市人，主治医师，医学学士，从事肝胆外科专业。
参考文献：
［1］Spivey JR.Glycochenodeoxycholate-induced lethal hepatocellular injury in rat hepatocytes:role of ATP depletion and cytostolic free calcium［J］.J Clin Invest,1993,92:17.
［2］Sokol RJ.Evidence for involvement of oxygen free radicals in bile acid toxicity to isolated rat hepatocytes［J］.Hepatology,1993,17:869.
［3］牟一平，彭淑牖.重视梗阻性黄疸时胆汁酸的毒性作用［J］.中国实用外科杂志，1996，16：16.
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